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可冷凍保存長達100天,明尼蘇達大學(xué)開發(fā)器官復(fù)溫技術(shù)

來源: 責編: 時間:2023-08-24 20:23:00 瀏覽量:269
導(dǎo)讀來源:生輝從人類心臟或肺與捐贈者分離的那一刻起,醫(yī)生有 4-6 小時的時間將其連接到新患者的血液供應(yīng)中,以免其受到不可挽回的損壞。對于肝臟來說,窗口期是 8-12 小時,對于腎臟來說,窗口期大約是 24-36 小時。根據(jù)世界衛(wèi)生組

來源:生輝fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

從人類心臟或肺與捐贈者分離的那一刻起,醫(yī)生有 4-6 小時的時間將其連接到新患者的血液供應(yīng)中,以免其受到不可挽回的損壞。對于肝臟來說,窗口期是 8-12 小時,對于腎臟來說,窗口期大約是 24-36 小時。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

根據(jù)世界衛(wèi)生組織的數(shù)據(jù),超過 60% 的捐贈心臟和肺未能及時到達接受者手中;只有不到 10% 需要器官移植的人真正得到了移植。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

因此,科學(xué)家們希望最終能夠建立冷凍保存的組織庫,例如皮膚、整個器官,甚至四肢,從而緩解短缺問題,并讓醫(yī)生有時間更好地為受試者移植做好準備。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

近日,來自明尼蘇達大學(xué)的研究人員報告稱,他們使用突破性的復(fù)溫技術(shù)成功地將玻璃化和復(fù)溫的腎臟移植到大鼠體內(nèi),并在移植 30 天內(nèi)恢復(fù)了完整的腎功能,且腎臟在低溫下持續(xù)保存長達 100 天。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

相關(guān)論文以題為“Vitrification and nanowarming enable long-term organ cryopreservation and life-sustaining kidney transplantation in a rat model”發(fā)表在 Nature Communications 期刊。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

可冷凍保存長達100天,明尼蘇達大學(xué)開發(fā)器官復(fù)溫技術(shù),移植30天后可恢復(fù)全部腎功能

(來源:Nat Commun

01 “納米復(fù)溫”實現(xiàn) 90s 內(nèi)解凍腎臟

現(xiàn)階段能在遠低于零攝氏度下長時間儲存并復(fù)活的最大生物體是人類胚胎。低溫生物學(xué)家 Greg Fahy 曾表示,如果用當今的技術(shù)對整個人進行嘗試,結(jié)果將是一具充滿有毒化學(xué)物質(zhì)的無生命尸體。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

Fahy 于 1985 年就在 Nature 發(fā)文,揭示了一種可以使小鼠胚胎在 -198℃ 下保存的化學(xué)過程,稱為“玻璃化冷凍”。這是一種使用更高濃度的冷凍保護劑(CPA)和更快的冷卻速度的方法,通過在冷卻過程中形成玻璃態(tài)來完全避免結(jié)晶,現(xiàn)常被用于卵子和胚胎冷凍。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

該技術(shù)解決了冷凍過程中的主要障礙:冰。當水結(jié)冰時,它會對組織內(nèi)部造成嚴重破壞,水分子從緊密堆積的無定形流體轉(zhuǎn)變?yōu)閯傂跃Ц瘢竦蹲右粯铀毫鸭毎6鋬霰Wo劑(CPA)可以稀釋粘性液體中的水分子,從而阻止冰晶的形成。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

復(fù)溫過程同樣重要。如果物體升溫太慢,當組織接近冰點時就會形成冰晶;如果加熱不均勻,不均勻的膨脹或收縮引起的應(yīng)力會使物體破裂。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

領(lǐng)導(dǎo)此次研究的 John Bischof 是明尼蘇達大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程系教授,在過去幾年,他領(lǐng)導(dǎo)團隊嘗試了從激光到導(dǎo)熱網(wǎng)的各種方法來快速、均勻加熱玻璃化組織。基于磁場和鐵納米顆粒相結(jié)合,研究人員開發(fā)了一種稱之為“納米復(fù)溫”(nanowarming)的技術(shù),可以保證較大器官內(nèi)部以及整個器官均勻升溫。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

具體而言,氧化鐵納米顆粒與 CPA 溶液會一起灌注到整個器官脈管系統(tǒng)中。當腎臟需要復(fù)溫時,射頻線圈會感應(yīng)交變磁場,均勻加熱納米顆粒。腎臟重新升溫后,CPA 和納米顆粒會一起被沖出腎臟。此外,無論器官大小如何,毛細血管內(nèi)的灌注都可以充分均勻地輸送 CPA 和氧化鐵納米顆粒。因此,納米復(fù)溫本質(zhì)上可以擴展到人體大小的器官以進行臨床轉(zhuǎn)化。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

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可冷凍保存長達100天,明尼蘇達大學(xué)開發(fā)器官復(fù)溫技術(shù),移植30天后可恢復(fù)全部腎功能

圖 | “納米復(fù)溫”具體過程(來源:[1])

首先,研究人員對 5 只大鼠腎臟進行玻璃化冷凍,并轉(zhuǎn)移至-150℃ 的冰箱中保存。當需要復(fù)溫時,使用 15kW 射頻線圈在 63kA/m 和 180kHz 條件下,90s 內(nèi)即可解凍腎臟。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

然后,研究人員通過將器官連接到機器而不是移植到實際動物體內(nèi),測試了幾個離體復(fù)溫腎臟的功能。作為對照,他們使用了在 4°C 下冷藏 24 小時的腎臟和用不含氧化鐵納米顆粒的 CPA 溶液沖洗的腎臟,這些腎臟都沒有玻璃化,也沒有重新加熱。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

在肌酐清除率(腎功能的主要標志)方面,復(fù)溫的腎臟表現(xiàn)比新鮮的腎臟差,但與 CPA 沖洗的腎臟相當,這表明這種非嚴重的功能喪失是由于 CPA 毒性而不是玻璃化/復(fù)溫過程所導(dǎo)致。重新加熱和 CPA 沖洗的腎臟也基本上與冷藏的腎臟一樣。所有組的尿量均接近正常。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

體內(nèi)實驗表明,經(jīng)過最初一段時間的調(diào)整后,納米加熱的腎臟在活體大鼠中的表現(xiàn)與新鮮移植物一樣好。移植后一到兩周,腎功能的所有主要標志物均恢復(fù)正常。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

此外,腎臟還產(chǎn)生促紅細胞生成素(一種刺激紅細胞生成的激素),并將維生素 D 轉(zhuǎn)化為其活性形式。在隨訪期結(jié)束時,這兩項功能也顯得正常。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

可冷凍保存長達100天,明尼蘇達大學(xué)開發(fā)器官復(fù)溫技術(shù),移植30天后可恢復(fù)全部腎功能

(來源:明尼蘇達大學(xué)官網(wǎng))

值得注意的是,在這項研究中,移植前,玻璃化大鼠腎臟低溫保存時間長達 100 天;腎臟移植后,5 只老鼠接受者均能夠在 30 天內(nèi)恢復(fù)全部腎功能,無需額外干預(yù)。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

“在最初的兩到三周內(nèi),腎臟并未完全發(fā)揮功能,但到了三周后,它們就恢復(fù)了。一個月后,它們的腎臟就功能齊全,與移植的新鮮器官完全沒有區(qū)別。”該研究的共同資深作者、明尼蘇達大學(xué)醫(yī)學(xué)院移植外科醫(yī)生和外科教授 Erik Finger 介紹稱。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

現(xiàn)在,研究人員已經(jīng)轉(zhuǎn)向豬腎臟,其更接近人類腎臟的大小。Bischof 暫未透露任何關(guān)于這項研究的細節(jié)。此外,F(xiàn)inger 也表示,在人類移植中,會實施更多的干預(yù)措施,包括藥物和透析等,來輔助腎臟移植。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

02 避免超低溫或增壓或是冷凍保存的新方式

其他科學(xué)家正在尋求其他方式解決玻璃化問題,如避免超低溫或增壓。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

麻省總醫(yī)院生物醫(yī)學(xué)研究員 Shannon Tessier 研究過青蛙和其他在接近冰點的環(huán)境下冬眠的動物,如木蛙三分之二的身體在 -16℃ 的溫度下冷凍數(shù)月后仍能恢復(fù)活力。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

她表示,隨著冬天的到來,青蛙的肝臟產(chǎn)生葡萄糖,在組織內(nèi)充當抗凍劑。組織內(nèi)的抗氧化劑水平增加,防止細胞中氧含量突然變化造成的損害。青蛙血液中的特殊蛋白質(zhì)充當冰晶的“種子”,引導(dǎo)冰在更耐用的脈管系統(tǒng)中開始生長,而不是在其他更脆弱的組織中開始。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

包括 Tessier 在內(nèi)的一組科學(xué)家通過向人類肝臟注入合成糖來模仿青蛙,這種合成糖與天然葡萄糖不同,不會代謝成有毒副產(chǎn)品。2019 年,他們宣布該方法使他們將人類肝臟在 –4°C 下保存了 27 小時,是捐贈肝臟標準壽命的兩倍多。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

可冷凍保存長達100天,明尼蘇達大學(xué)開發(fā)器官復(fù)溫技術(shù),移植30天后可恢復(fù)全部腎功能

圖 | 木蛙可以在加拿大北極等地的部分冷凍狀態(tài)下存活數(shù)月(來源:[5])

最近,該團隊將這種合成糖與 Snomax 的輸液相結(jié)合,Snowmax 是一種生物造雪劑,可以讓水滴的凝結(jié)溫度更高,凝結(jié)速度更快。像木蛙血液中的蛋白質(zhì)一樣,Snomax 減緩了冰的形成并將其集中在大鼠肝臟的血管中,使它們能夠在 -5°C 下部分冷凍長達 15 天,然后在有限的損傷下解凍。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

此外,Tessier 團隊將微小的斑馬魚幼蟲冷凍在 -10°C 下 3 天;解凍后,一半的魚可以存活下來并繼續(xù)生長。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

加州大學(xué)伯克利分校的 Boris Rubinsky 教授也在低溫生物學(xué)方面有所研究,他發(fā)現(xiàn),較高的壓力可以限制冰的形成。今年 4 月份,他們團隊將豬心臟在 -4℃ 下冷凍了 21 小時,復(fù)溫并移植后,心臟可以正常跳動。這種策略減少了 CPAs 的使用,限制了毒副作用。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

美國農(nóng)業(yè)部食品技術(shù)專家 Cristina Bilbao-Sainz 利用這種方式保存食物,包括在保存菠菜、櫻桃和土豆上均表現(xiàn)不錯,并在 2022 年 12 月份,與一家未具名公司達成合作。fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

參考資料:fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

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1.Han, Z., Rao, J.S., Gangwar, L. et al. Vitrification and nanowarming enable long-term organ cryopreservation and life-sustaining kidney transplantation in a rat model. Nat Commun 14, 3407 (2023). https://doi.org/10.1038/s41467-023-38824-8fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

2.Rall, W., Fahy, G. Ice-free cryopreservation of mouse embryos at −196 °C by vitrification. Nature 313, 573–575 (1985). https://doi.org/10.1038/313573a0fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

3.https://twin-cities.umn.edu/news-events/first-successful-transplant-functional-cryopreserved-rat-kidneyfDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

4.https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2781097/fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

5.https://www.science.org/content/article/how-to-deep-freeze-entire-organ-bring-it-back-to-lifefDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

6.https://www.donoralliance.org/newsroom/donation-essentials/what-is-the-time-frame-for-transplanting-organs/fDH28資訊網(wǎng)——每日最新資訊28at.com

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